石蜡切片的问题及解决方法
来源:科研共享联盟
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时间:2018/9/10 13:39:58

          石蜡包埋制片术是组织切片制作最常用的一种技术。其基本步骤包括取材、固定、脱水、浸蜡、包埋、切片、染色和封片等,其中切片是最重要的环节。

          石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。

          针对石蜡切片过程中出现的问题,现以问题一原因一解决方法的模式,推送如下。(建议把本文保存,必要时方便解决问题~)

石蜡带弯曲不直

原因:

      1、石蜡块上下两边不平行

  2、石蜡块的上下两边不和刀口平行

  3、刀口锋利不一,局部产生差异

  4、蜡块的一边较另一边为软,或两边的硬度不一致

  5、材料未居蜡块正中央

  6、材料大而形不正

补救办法:

  1、取下台木,将两边修干

  2、调节标本台,使两者平行

  3、移动刀片,改用新的刀口

  4、待蜡块冷却后再切,或重新包埋

  5、用刀片切去部分石蜡,使材料居中

  6、在大的一边切去少许石蜡

切片分离、不能连成带状

原因:

    1、室温过低

  2、石蜡过硬

  3、材料边缘留蜡太少

  4、刀的角度不适合

补救办法:

  1、在切片机上方开一电灯或提高室温

  2、在蜡块面加一层45℃的软蜡或用手指蜡摩擦块面

  3、重新包埋

  4、矫正刀的角度

切片卷起呈圆筒状

原因:

    1、室温过低

  2、石蜡过硬

  3、刀口太钝

  4、刀的倾角太大

补救办法:

  1、提高室温

  2、加软蜡

  3、用毛笔将蜡片摊开压住,切2—3片即成带

  4、减小倾角

切片纵裂

原因:

    1、刀有缺口

  2、石蜡块中含有颗粒、杂质

  3、刀口留有碎屑或细丝

  4、组织太硬

补救办法:

       1、可移动刀口

  2、将颗粒拽去

  3、清洁刀口

  4、让包埋块在水中浸泡

切片有横纹

原因:

    1、刀和台木的固定螺丝太松

  2、刀口倾斜度太大

  3、刀口有石蜡屑 

补救办法:

       1、旋紧螺旋

  2、可放平1—2。后再切

  3、用氯仿拭去

切片厚薄不匀

原因:

    1、切片机有毛病

  2、夹刀不当

  3、未旋紧标本台螺旋

  4、石蜡块过硬

补救办法:

       1、矫正切片机装置

  2、对症治疗

  3、旋紧螺旋

  4、将石蜡块在水中浸泡

材料发生裂隙破碎或脱落

原因:

  1、脱水不干净

  2、有透明剂残留

  3、石蜡透入时,温度过高或时间过长

  4、由于脱水剂和透明剂的影响,使组织变硬发脆

  5、材料太硬或太粗

补救办法:

       1、无法弥补

  2、增加浸蜡时间,重新包埋

  3、无法补救

  4、用正丁醇、叔丁醇和二氧六环等进行脱水和透明

  5、在蜡块表面涂一薄层火棉胶溶液

切片时发生沙沙声

原因:

  1、组织块过硬

  2、包埋温度过高

  3、材料内留有结晶体 

补救办法:

       1、浸泡水中软化

  2、无法补救

  3、无法补救

石蜡块将蜡带抬起

原因:

  1、由于摩擦而产生静电荷所致

  2、石蜡块上面附有石蜡碎屑

  3、刀口上附有石蜡碎屑

补救办法:

       1、提高室温

 2、用刀片将碎屑清除

  3、用二甲苯或氧化清除

来源:知乎

作者:autumn

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